最新公告: 分析单克隆抗体制备过程单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。单克隆抗体制备过程1、免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺
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根据实验类型选择合适的ELISA试剂盒
点击次数:137 发布时间:2017/8/9
   根据实验类型选择合适的ELISA试剂盒
  ELISA技术可用于测定抗原,也可用于测定抗体。ELISA方法中有三个必要的试剂:
  (1)固相的抗原或抗体,即"免疫吸附剂";
  (2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物";
  (3)酶反应的底物。
  一般可将ELISA分为以下几种类型,实验君首先需要根据自己的待检物来确定试剂盒类型。
  1)双抗体夹心法:针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相捕获抗体和酶标检测抗体。适用于测定二价或二价以上的大分子抗原如血浆中的细胞因子,不适用于测定半抗原及小分子单价抗原。同理,也有双抗原夹心法测抗体。
  2)直接法:将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一抗,即可测定抗原总量。此法操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
  3)间接法:间接法是检测抗体常用的方法,其原理为利用酶标记的抗抗体(抗人免疫球蛋白抗体)来检测与固相抗原结合的待检抗体。
  4)竞争法:小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。
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