最新公告: 操作鱼类Elisa试剂盒时需要注意的事项鱼类Elisa试剂盒操作步骤:1,试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。2,实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3,不用的其它试剂应包装好或盖好。4,使用一次性的吸头以免交叉污染,避免使用带金属部分的加样器。5,使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6,洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。8,严格按照说明书的操作方
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牛ELISA试剂盒样本处理
点击次数:49 发布时间:2017/9/26
 
   牛ELISA试剂盒样本处理
  牛ELISA试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中牛口蹄疫(FMD)。用纯化的牛口蹄疫(FMD)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中口蹄疫(FMD)相结合,经洗涤除往未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的口蹄疫(FMD)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终极的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中牛口蹄疫(FMD)的存在与否。
  牛ELISA试剂盒样本处理及要求:
  1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
  2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
  3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
  4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  5.组织标本:切割标本后,称取重量。加进一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加进一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
  6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
  7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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